Теория и практика науки и образования №4 (4) июнь 2026 г.

Женьшень настоящий (Panax ginseng C.A. Меу) занимает ведущее место в номенклатуре лекарственного сырья благодаря адаптогенному, тонизирующему и метаболическому действию. Основную группу биологически активных веществ (БАВ) растения составляют тетрациклические тритерпеновые сапонины даммаранового ряда — панаксазиды (гинзенозиды).

Широкое применение препаратов женьшеня требует жесткого контроля их качества. Поскольку содержание гинзенозидов варьируется под влиянием возраста растения, климата, условий сушки и хранения, первоочередной задачей фармацевтического анализа становится валидация надежных методов идентификации БАВ. Современная стандартизация сырья не может ограничиваться определением суммы сапонинов, а требует прецизионного профилирования отдельных компонентов, что обусловливает актуальность исследования.

Цель исследования

Изучение теоретических аспектов классификации гинзенозидов, экспериментальное проведение их качественного и количественного анализа в корне женьшеня методами ТСХ и ВЭЖХ, а также обоснование значимости данных подходов для стандартизации сырья.

Материалы и методы исследования

Объектом исследования служили высушенные корни женьшеня настоящего (Panax ginseng), измельченные и просеянные через сито с диаметром отверстий около 1 мм. Навеску массой 1,002 г (точная навеска) количественно переносили в круглодонную колбу на 100 мл.

Экстракцию проводили 70%-ным метиловым спиртом для максимального извлечения диольных и триольных гликозидов. Экстрагирование осуществляли на кипящей водяной бане с обратным холодильником в два этапа: сначала в течение 1 часа с 30 мл спирта (с последующим фильтрованием), затем процедуру повторяли с 15 мл растворителя в течение 30 минут. Извлечения объединяли, охлаждали и доводили метанолом до 50 мл в мерной колбе (испытуемый раствор А).

Качественный анализ методом ТСХ выполняли на пластинах «Сорбфил» (ПТСХ-АФ-А). На линию старта наносили по 5 мкл раствора А и растворов свидетелей гинзенозидов Rb₁, Rg₁ и Re (Sigma-Aldrich). Хроматографирование проводили в насыщенной камере в системе хлороформ – метанол – вода (65:35:10, нижний слой); дистанция пробега фронта — 9 см. Пластину обрабатывали 10%-ным спиртовым раствором фосфорно-вольфрамовой кислоты и визуализировали в сушильном шкафу при 105°C (5–7 минут).

Количественное определение выполняли на жидкостном хроматографе с диодно-матричным детектором (ДМД). Разделение протекало на обращенно-фазовой колонке C (250 × 4,6 мм, 5 мкм). Подвижная фаза: бинарная система 18 из ацетонитрила и 0,1%-ного водного раствора ортофосфорной кислоты в градиентном режиме (доля ацетонитрила увеличивалась с 19% до 40% за 60 минут). Скорость потока — 1,0 мл/мин, объем петли инжектора — 10 мкл, детектирование — при λ = 203 нм.

Результаты исследования и их обсуждение

С точки зрения химического строения сапонины женьшеня представляют собой стероидоподобные тетрациклические тритерпеновые гликозиды даммаранового типа. По строению агликона их подразделяют на три структурные группы:

1. Группа   протопанаксадиола   (PPD):       углеводные          остатки присоединены к положениям С-3 и/или С-20 (Rb₁ , Rb₂ , Rc, Rd, Rg₃ ).
2. Группа протопанаксатриола (PPT): имеют гидроксильную группу у С-6; сахара связываются с С-6 и/или С-20 (Rg₁ , Re, Rf, Rh₁ ).
3. Группа олеаноловой кислоты: пентациклические тритерпеноиды (главный представитель — гинзенозид Ro).

Фармакологический профиль сырья зависит от соотношения групп PPD (седативное, антистрессовое действие) и PPT (стимулирующий и тонизирующий эффекты).

При экспресс-анализе экстракта методом ТСХ после детекции на хроматограмме проявилась серия обособленных зон специфических оттенков, подтверждающих тритерпеновую природу веществ. Путем сопоставления значений R_fс аутентичными стандартами были идентифицированы три доминирующих гинзенозида (Таблица 1).

Таблица 1

Результаты идентификации гинзенозидов методом ТСХ

Выбранная система растворителей обеспечивает высокую чёткость разделения без «хвостения» пятен, что позволяет рекомендовать её для рутинного контроля подлинности сырья.

Для количественного определения использовали метод ВЭЖХ. Из-за отсутствия сопряженных двойных связей гинзенозиды практически не поглощают в УФ-области выше 210 нм. Детектирование при 203 нм потребовало применения реактивов УФ-градации для минимизации шумов базовой линии. Пики идентифицировали по времени удерживания (t_R), расчет вели методом внешнего стандарта. Подобное профилирование критично для подтверждения аутентичности вида Panax ginseng и выявления фальсификаций (например, Panax quinquefolius).

В исследованном образце в пересчете на сухое сырье определено: гинзенозид Rb₁ — 0,65%; гинзенозид Rg₁ — 0,42%; гинзенозид Re — 0,28%.  Сумма Rb₁ и Rg₁ составила 1,07%, что полностью удовлетворяет требованиям

Государственной Фармакопеи (не менее 0,8%). Сырье является подлинным и доброкачественным.

Заключение

В работе освоена методология фитохимического анализа сапонинов рода Panax. Экспериментально показано, что ТСХ является оптимальным экспрессметодом для первичного скрининга подлинности, в то время как обращеннофазовая ВЭЖХ обеспечивает высокую точность количественного определения гинзенозидов (Rb₁ , Rg₁ , Re). Сквозная стандартизация сырья хроматографическими методами гарантирует стабильность его состава и воспроизводимость терапевтической эффективности.

***

1. Самылина И. А., Аносова О. Г. Фармакогнозия. Атлас. — М. : ГЭОТАР-Медиа, 2010. — 544 с.
   
   
2. Куркин В. А. Фармакогнозия : учебник. — Самара : Офорт, 2014. — 1239 с.
   
   
3. Киселева Т. Л., Смирнова Ю. А. Стандартизация лекарственного растительного сырья с тритерпеновыми гликозидами // Фармация. — 2019. — Т. 68, № 4. — С. 175–182.
   
   
4. European Pharmacopoeia. 10th ed. — Strasbourg : EDQM, 2019. — Vol. 1. — Ginseng root. — P. 1425–1427.